Análisis molecular de la disfunción de la célula β pancreática

Son múltiples las alteraciones que conducen  a la disfunción de la célula β, las cuales serán expuestas con el objetivo de analizar las bases moleculares y los mecanismos que condicionan el mal funcionamiento celular necesario para el desarrollo de la enfermedad.


Mecanismos moleculares:

• Glucotoxicidad
• Lipotoxicidad
• Estrés oxidativo
• Disfunción mitocondrial
• Estrés del retículo endoplásmico

Las alteraciones moleculares condicionan el mal funcionamiento celular que se expresa con hiperglucemia al no poder responder a la demanda secretora de insulina. De ser sostenidas en el tiempo, estas alteraciones moleculares conducen a un aumento anormal de la apoptosis, evento que condiciona la progresión hacia una etapa irreversible.

http://www.revistasad.org.ar/numeros/2009_43_3/8_analisis_molecular.pdf

PCR en diabetes mellitus

El diagnóstico molecular  se lleva a cabo por medio de la PCR, empleando ADN  extraído del paciente, posteriormente, se amplifica el gen candidato empleando iniciadores (primers) específicos de éste gen, el cual se le considera un marcador molecular. 

PCR Array: La matriz de PCR es un conjunto de optimizados en tiempo real ensayos de cebadores de PCR en 96-384 o bien bien placas de vía o genes de la enfermedad se centraron así como adecuados controles de calidad de ARN. La matriz de PCR realiza el análisis de la expresión de genes en tiempo real, la de la PCR y la capacidad de creación de perfiles de genes múltiples de un microarray. Simplemente mezcle la plantilla de cDNA con la correspondiente lista de usar PCR master mix, los volúmenes de alícuotas iguales a cada pocillo de la placa misma, a continuación, ejecutar el programa de PCR en tiempo real en bicicleta.

http://www.postgradoeinvestigacion.uadec.mx/Documentos/AQM/MARCADORES%20MOLECULARES%20PARA%20EL%20DIAGN%C3%93STICO%20TEMPRANO%20DE%20LA%20DIABETES%20MELLITUS.pdf
http://www.sabiosciences.com/rt_pcr_product/HTML/PAHS-023A.html

Pruebas Confirmatorias

Para confirmar que el paciente presenta diabetes mellitus se debe realizar:

Examenes de laboratorio:

• Glicemia en ayunas o post-prandial 
• Hemoglobina A1c
• Perfil lipidico (colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL y trigliceridos)
• Creatinina serica para estimar la velocidad de filtración glomerular
• Orina completa (glucosa, cetonas, proteínas y sedimiento)
• Microalbuminuria en pacientes sin proteinuria

Examen físico general y segmentario:

• Peso, talla, IMC y circunferencia de cintura
• Presión Arterial (acostado y de pie)
• Piel (acantosis nigricans, vitiligo, micosis, heridas, ulceras)
• Exploración de la cavidad oral
• Examen cardiovascular: corazón, carótidas, arterias periféricas de ambas extremidades (femorales, poplíteas, tibiales posteriores y pedias)
• Examen de los pies: neurologíco de las extremidades inferiores

Además de la evaluación clínica y los examenes de laboratorio ya citados es necesaria la búsqueda dirigida de daño en órganos blanco: riñón, retina, nervios periféricos y corazón. Una vez realizada la evaluación completa del paciente el medico podrá precisar la existencia de complicaciones crónicas de la diabetes y clasificar al paciente según su riesgo cardiovascular.

 http://www.redsalud.gov.cl/portal/url/item/72213ed52c3e23d1e04001011f011398.pdf

Pruebas de Screening

Tanto la prueba de glucosa plasmática en ayunas, como la prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) son adecuadas para determinar si hay diabetes.  

La prueba de glucosa en ayunas es preferida debido a que es más sencillo, más rápido, mas barato y aceptable para el paciente. Esta prueba se debe realizar cada tres años a personas mayores de 45 años y una vez al año a pacientes que presentes mas de dos de los siguientes factores:

• IMC: mayor a 25 kg/m2
• Índice relación cintura/cadera: mujeres > 0.8 hombres > 0.9
• Antecedentes de Diabetes Mellitus Gestacional
• Menor de 50 años con enfermedad coronaria
• Hipertensión Arterial
• Trigliceridos > 150 mg/dl con HDL < 35 mg/dl
• PTOG anormal

Los resultados se interpretan asi: Normal < 100 mg/dl, Alterada entre 100-125 mg/dl, Anormal mayor o igual a 126 mg/dl (Se debe confirmar el diagnostico de DM)

La PTOG es el resultado de la glicemia dos horas despues de tomar una carga de 75 g de glucosa mas 300cc de agua. 

Las condiciones para una buena toma de PTOG son: tener de 8 a 14 hora de ayuno, evitar restricciones en la dieta durante los tres dias precedentes, evitar cambios en la actividad fisica durante los 3 dias anteriores, no se debe estar enfermo, no se realiza a pacientes con HIV (+).

Los resultados se interpretan asi: Normal < 140 mg/dl, Intolerancia a la glucosa 140 a 199 mg/dl, Diabetes Mellitus igual o mayor a 200 mg/dl.

http://www.sumimedical.com/GuiasClinicas/Guia_Diabetes_07.pdf

Diabetes Mellitus

 La diabetes mellitus es una enfermedad producida por una alteración del metabolismo, caracterizada por un aumento de la cantidad de glucosa en la sangre y por la aparición de complicaciones microvasculares y cardiovasculares que incrementan sustancialmente los daños en otros órganos (riñones, ojos, corazón, nervios periféricos) y la mortalidad asociada con la enfermedad. Su frecuencia aumenta significativamente con la edad, el exceso de peso y la vida sedentaria.

http://www.geosalud.com/diabetesmellitus/diabetes.htm